Fosfatidylserínzlepšuje funkciu nervových buniek, reguluje prenos nervových vzruchov a zlepšuje funkciu pamäti mozgu. Vďaka svojej silnej lipofilite môže po absorpcii rýchlo vstúpiť do mozgu cez hematoencefalickú bariéru, pričom zohráva úlohu pri upokojovaní buniek hladkého svalstva ciev a zvyšovaní zásobovania mozgu krvou.
Aká je teda testovacia metóda?
1. Vzorový produkt: Fosfátový idylserín
2. Obsah testu: PS test
3. Princíp: Po rozpustení alebo extrakcii rozpúšťadla sa vzorka oddelí vysoko-
výkonová kvapalinová chromatografia, detekovaná UV detektorom a kvantifikovaná metódou externého štandardu.
A. 1 Prístroj a vybavenie
A. 1.1 Vysokoúčinná kvapalinová chromatografia: UV detektor: kvapalina Si 100 (alebo Si{3}})
chromatografická kolóna (250 mm x 4,6 mm, 5 um).
A. 1.2 Analytické váhy: citlivosť 0,01 mg.
A. 1.3 Ultrazvukový oscilátor
A. 2 Reagencie a roztoky
A. 2.1 n-hexán: chromatograficky čistý A. 2.2 Acetonitril: Chromaticky čistý
A. 2.3 Metanol: Chromaticky čistý
A. 2.4 Kyselina fosforečná: chromatograficky čistá
A.2.5 fosfátový idylserínový štandard, s čistotou vyššou ako 95 %.
A. 2.6 Príprava štandardného roztoku
Vezmite primerané množstvo fosfatidylserínovej referenčnej látky, presne ju odvážte, postupne rozpustite v n-hexáne a kvantitatívne pripravte referenčný roztok
obsahujúce {{0}}. 1 mg, 0,2 mg, 0,4 mg, 0,8 mg a 1,6 mg na 1 ml. Po uzavretí skladujte pri teplote nižšej ako -16 stupňov pre budúce použitie.
A. 3 kroky analýzy
A. 3.1 Príprava vzorky
Presne odvážte 50 mg vzorky fosfatidylserínu (s presnosťou na 0,1 mg) a vložte ju do 50 ml odmernej banky. Pridajte vhodné množstvo n-hexánu a sonikujte 5 minút, aby sa vzorka rozpustila. Po návrate na teplotu miestnosti použite n-hexán na doplnenie objemu, pretrepte
dobre a pripravte testovací roztok.
A. 3.2 Referenčné chromatografické podmienky sú nasledovné:
a) Chromatografická kolóna: kolóna pre kvapalinovú chromatografiu Si 100 (alebo Si{1}}) (250 mm × 4,6 mm, 5 μm) alebo ekvivalentná chromatografická kolóna;
b) Mobilná fáza: acetonitril (chromatograficky čistý): metanol roztok kyseliny fosforečnej (chromatograficky čistý metanol: chromatograficky čistá kyselina fosforečná
kyselina=92.5:7,5)=93:7 (V: V), pomer mobilnej fázy je možné upraviť podľa rôznych typov chromatografických kolón.
c) Detekčná vlnová dĺžka: 205 nm;
d) prietoková rýchlosť: 1 ml/min;
e) Teplota merania: 30 stupňov;
f) Objem vstreku: 20 μl.
A. 4. Tvorba štandardných kriviek
Vezmite štandardnú sériu roztokov a vykonajte chromatografickú analýzu za referenčných chromatografických podmienok. Nakreslite štandardnú krivku s koncentráciou štandardného roztoku ako osou x a plochou píku ako osou y.
A.5.Analýza roztoku vzorky
Nastreknite roztok vzorky do kvapalinového chromatografu, zmerajte plochu píku a zistite koncentráciu fosfatidylserínu v roztoku vzorky, ktorý sa má testovať, podľa štandardnej krivky.
Vypočítajte obsah fosfatidylserínu vo vzorke podľa rovnice (1):
V rovnici:
W - obsah fosfatidylserínu vo vzorke, v %;
ρ- koncentrácia fosfatidylserínu, ktorá sa má merať, získaná zo štandardnej pracovnej krivky v miligramoch na mililiter (mg/ml);
V - objem roztoku vzorky v mililitroch (ml); M - Hmotnosť vzorky v miligramoch (mg);
K - Obsah štandardnej látky.
Ako výsledok vezmite aritmetický priemer výsledkov dvoch paralelných meraní.
Prípustná odchýlka
Rozdiel medzi dvoma meraniami tej istej vzorky nesmie presiahnuť 10 % priemeru týchto dvoch meraní.
Predaj: Josy
Mobil:+86-13279399072
E-mail:sales1@konochemical.com